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分光光度計(jì)作為現(xiàn)代分析化學(xué)領(lǐng)域的重要儀器,其工作原理基于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收特性,即朗伯-比爾定律。該定律指出,當(dāng)一束平行單色光穿過均勻的非散射性物質(zhì)時(shí),物質(zhì)對(duì)光的吸收程度與物質(zhì)濃度及光在物質(zhì)中傳播的路徑長(zhǎng)度成正比。在實(shí)際應(yīng)用中,分光光度計(jì)首先通過光源系統(tǒng)產(chǎn)生連續(xù)波長(zhǎng)的光,常見的光源有鎢燈(適用于可見光區(qū),波長(zhǎng)范圍320-2500nm)和氘燈(適用于紫外光區(qū),波長(zhǎng)范圍190-400nm)。隨后,單色器將連續(xù)光分解為單一波長(zhǎng)的單色光,單色器的重要部件是棱鏡或光柵,其中光柵憑借更高的波長(zhǎng)分辨率和更寬的波長(zhǎng)覆蓋范圍,在現(xiàn)代分光光度計(jì)中應(yīng)用更廣。單色光穿過裝有樣品溶液的比色皿后,部分光被樣品吸收,剩余光被檢測(cè)器接收。檢測(cè)器通常為光電倍增管或光電二極管陣列,能將光信號(hào)轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的電信號(hào),再經(jīng)信號(hào)處理系統(tǒng)放大、轉(zhuǎn)換后,在顯示系統(tǒng)上以吸光度或透光率的形式呈現(xiàn)。通過將樣品的吸光度與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度進(jìn)行對(duì)比,結(jié)合朗伯-比爾定律公式(A=εbc,其中A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),b為光程長(zhǎng)度,c為物質(zhì)濃度),即可精確計(jì)算出樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度,這一過程在環(huán)境監(jiān)測(cè)、分析、食品檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用。分光光度計(jì)的光源穩(wěn)定性直接關(guān)系到檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。深圳石墨爐原子吸收分光光度計(jì)選購(gòu)指南
紫外可見分光光度計(jì)在環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域的水質(zhì)總有機(jī)碳(TOC)檢測(cè)中有jiao應(yīng)用,TOC是反映水體有機(jī)物污染程度的重要指標(biāo),國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB11914-89)推薦采用紫外氧化-分光光度法。檢測(cè)原理為:水樣中的有機(jī)碳在紫外光(波長(zhǎng)185nm)照射下被氧化為二氧化碳,二氧化碳與水中的氫氧化鈉反應(yīng)生成碳酸氫鈉,再加入酚酞指示劑,碳酸氫鈉與酚酞形成紅色絡(luò)合物,該絡(luò)合物在550nm波長(zhǎng)處有特征吸收,吸光度與TOC濃度呈線性關(guān)系。操作流程:取水樣10mL,加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至10-11,置于紫外氧化裝置中照射30min,冷卻后加入酚酞指示劑,用紫外可見分光光度計(jì)測(cè)量吸光度。通過TOC標(biāo)準(zhǔn)曲線(濃度1-10mg/L,R2≥)計(jì)算水樣TOC含量,通常地表水TOC限值為2mg/L,工業(yè)廢水需≤10mg/L。檢測(cè)中需注意,水樣需經(jīng)μm濾膜過濾去除懸浮物,避免其遮擋紫外光影響氧化效率;紫外燈需定期更換(使用壽命約1000h),確保氧化強(qiáng)度穩(wěn)定;空白實(shí)驗(yàn)需用超純水,清理水中固有有機(jī)物干擾,該方法檢測(cè)速度快(單個(gè)樣品≤1h),為水質(zhì)污染預(yù)警與治理提供分析手段。 深圳石墨爐原子吸收分光光度計(jì)選購(gòu)指南分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度需定期校準(zhǔn),確保測(cè)量可靠。
分光光度計(jì)在工業(yè)廢水處理中的總磷檢測(cè)中應(yīng)用較多,總磷是導(dǎo)致水體富營(yíng)養(yǎng)化的關(guān)鍵指標(biāo),國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB8978-1996)規(guī)定工業(yè)廢水總磷排放限值為(一級(jí)標(biāo)準(zhǔn))。常用的鉬酸銨分光光度法原理為:在酸性條件下,廢水中的磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)生成磷鉬雜多酸,再被抗壞血酸還原為藍(lán)色的磷鉬藍(lán),該藍(lán)色物質(zhì)在700nm波長(zhǎng)處有較大吸收峰。檢測(cè)流程:取適量廢水樣品,加入K2S2O8溶液,在高溫蒸汽滅菌器中120℃消解30分鐘,將有機(jī)磷、聚磷酸鹽轉(zhuǎn)化為正磷酸鹽;消解后冷卻,加入鉬酸銨-抗壞血酸混合試劑,在25℃下反應(yīng)15分鐘,用分光光度計(jì)測(cè)量吸光度,結(jié)合磷標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總磷濃度。操作中需注意,K2S2O8消解需確保滅菌器壓力達(dá)到,壓力不足會(huì)導(dǎo)致聚磷酸鹽轉(zhuǎn)化不完全;鉬酸銨溶液需用H2SO4調(diào)節(jié)pH值,pH值過高會(huì)影響磷鉬雜多酸的生成;抗壞血酸需現(xiàn)配現(xiàn)用,防止氧化失效導(dǎo)致還原反應(yīng)不充分。分光光度計(jì)需定期校準(zhǔn)700nm波長(zhǎng)的吸光度線性,確保總磷濃度在范圍內(nèi)的測(cè)定誤差≤±4%,為工業(yè)廢水處理效果的評(píng)估與排放達(dá)標(biāo)監(jiān)測(cè)提供可靠數(shù)據(jù)。
分光光度計(jì)在土壤檢測(cè)中的有機(jī)質(zhì)含量測(cè)定中應(yīng)用關(guān)鍵,土壤有機(jī)質(zhì)是土壤肥力的重要指標(biāo)之一,其含量直接影響土壤的物理、化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)。常用的檢測(cè)方法為重鉻酸鉀氧化-外加熱分光光度法,該方法的原理是在170-180℃的條件下,用重鉻酸鉀-硫酸溶液氧化土壤中的有機(jī)質(zhì),重鉻酸鉀被還原為三價(jià)鉻離子,三價(jià)鉻離子在600nm波長(zhǎng)處有較大吸收峰。分光光度計(jì)通過測(cè)量三價(jià)鉻離子的吸光度,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算出土壤有機(jī)質(zhì)的含量,該方法的檢測(cè)范圍為,適用于各類土壤樣品的檢測(cè)。在檢測(cè)過程中,土壤樣品需經(jīng)過風(fēng)干、研磨、過篩(100目篩)等預(yù)處理步驟,確保樣品均勻且無(wú)雜質(zhì),若樣品中含有石塊或植物殘?bào)w,會(huì)影響有機(jī)質(zhì)的氧化效率,導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果偏差。重鉻酸鉀-硫酸溶液具有強(qiáng)腐蝕性,操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡,避免溶液接觸皮膚和眼睛。同時(shí),加熱過程需嚴(yán)格控制溫度在170-180℃,加熱時(shí)間為5分鐘,溫度過高或加熱時(shí)間過長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致重鉻酸鉀過度消耗,使檢測(cè)結(jié)果偏高;溫度過低或加熱時(shí)間不足,則會(huì)導(dǎo)致有機(jī)質(zhì)氧化不完全,檢測(cè)結(jié)果偏低。分光光度計(jì)在檢測(cè)前需用空白溶液進(jìn)行調(diào)零,空白溶液為不加土壤樣品的重鉻酸鉀-硫酸溶液,以消除試劑帶來(lái)的背景干擾,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 在實(shí)驗(yàn)室中,分光光度計(jì)常用于分析樣品的濃度。
分光光度計(jì)在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的植物葉綠素含量檢測(cè)中扮演著重要角色,葉綠素含量是反映植物光合作用能力和生長(zhǎng)狀況的重要指標(biāo)。常用的檢測(cè)方法為乙醇提取法,該方法是將植物葉片剪成細(xì)小碎片,準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量的樣品,加入80%的乙醇溶液,在黑暗條件下浸泡24小時(shí),期間需多次振蕩,確保葉綠素充分提取。提取完成后,用分光光度計(jì)分別在663nm和645nm波長(zhǎng)處測(cè)量提取液的吸光度,根據(jù)Arnon公式計(jì)算葉綠素a和葉綠素b的含量,葉綠素a含量(mg/g)=(???-???)×V/(1000m),葉綠素b含量(mg/g)=(???-???)×V/(1000m),其中V為提取液體積(mL),m為樣品質(zhì)量(g)。在操作過程中,葉片樣品需選擇新鮮、無(wú)蟲害的部位,且取樣時(shí)需避開葉脈,因?yàn)槿~脈中葉綠素含量較低,會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的代表性。提取過程需在黑暗條件下進(jìn)行,是由于葉綠素見光易分解,若暴露在光照下,會(huì)導(dǎo)致提取液中葉綠素含量降低,檢測(cè)結(jié)果偏小。分光光度計(jì)的比色皿需使用石英比色皿,因?yàn)?0%的乙醇溶液在紫外區(qū)有一定吸收,玻璃比色皿會(huì)影響吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確性,而石英比色皿在紫外-可見光區(qū)均有良好的透光性,可確保檢測(cè)結(jié)果可靠。環(huán)境監(jiān)測(cè)站用分光光度計(jì)檢測(cè)水質(zhì)中的重金屬含量。廣東實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)性能如何
自來(lái)水廠用分光光度計(jì)檢測(cè)水中余氯的含量是否達(dá)標(biāo)。深圳石墨爐原子吸收分光光度計(jì)選購(gòu)指南
分光光度計(jì)在石油產(chǎn)品分析中的應(yīng)用,主要用于檢測(cè)油品的純度、雜質(zhì)含量與化學(xué)組成,為石油加工與質(zhì)量管控提供依據(jù)。在汽油純度檢測(cè)中,汽油中的芳香烴在254nm波長(zhǎng)處有特征吸收,而烷烴、烯烴吸收較弱,可通過分光光度計(jì)測(cè)量汽油在254nm處的吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)純度汽油的吸光度對(duì)比,判斷汽油是否摻入低純度組分(如石腦油),芳香烴含量過高會(huì)導(dǎo)致汽油使用不充分,產(chǎn)生積碳,因此需將吸光度把控在特定范圍(如,具體取決于汽油標(biāo)號(hào))。在柴油中硫含量的檢測(cè)中,采用紫外熒光分光光度法,柴油樣品經(jīng)高溫使硫轉(zhuǎn)化為二氧化硫,二氧化硫在紫外光激發(fā)下產(chǎn)生熒光,熒光強(qiáng)度與硫含量成正比,在發(fā)射波長(zhǎng)330nm處測(cè)量熒光強(qiáng)度,檢測(cè)下限可達(dá),滿足國(guó)六排放標(biāo)準(zhǔn)中柴油硫含量≤的要求。在潤(rùn)滑油老化程度評(píng)價(jià)中,潤(rùn)滑油在使用過程中會(huì)氧化生成醛、酮等極性物質(zhì),這些物質(zhì)在270nm處有吸收,通過分光光度計(jì)測(cè)量潤(rùn)滑油在270nm處的吸光度變化,吸光度越高表明老化程度越嚴(yán)重,當(dāng)吸光度超過時(shí),需更換潤(rùn)滑油,避免設(shè)備磨損加劇。此外,分光光度計(jì)還可用于石油產(chǎn)品中金屬添加劑(如抗磨劑中的鋅、清凈劑中的鈣)的檢測(cè),通過灰化、酸溶等前處理將金屬元素轉(zhuǎn)化為離子態(tài),再與顯色劑。 深圳石墨爐原子吸收分光光度計(jì)選購(gòu)指南