DL2000 II DNA Marker:精細的DNA分子量標準DL2000 II DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標準,廣應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠為DNA分析提供精確的分子量參考。產品特點組成:DL2000 II DNA Marker 由6條線狀雙鏈DNA片段組成,片段大小分別為100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp和2000 bp。即用型設計:已預混1×Loading Buffer,使用時無需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩定性高:在室溫下可穩定存放,長期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量:建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-2.0%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5×TBE緩沖液,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,在紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融。瓊脂糖質量:電泳時應盡量選用高質量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。電泳緩沖液:及時更換電泳緩沖液并使用新制備的凝膠,以免影響電泳結果。通過各種生物學活性測定方法,如補體依賴的細胞毒法(CDC)、細胞/生長因子信號通路阻斷法。江蘇HPV疫苗開發服務技術服務研發
瓊脂糖凝膠電泳緩沖液是用于DNA、RNA或其他分子生物學樣品分離的實驗室試劑。它為電泳過程提供了必要的離子環境和pH條件,確保樣品在凝膠基質中能夠有效地分離。以下是一些關鍵點:1.作用:-提供穩定的離子環境,使DNA或RNA分子在電場作用下按大小分離。-維持pH穩定,避免樣品在電泳過程中發生降解或結構變化。2.常見類型:-TAE緩沖液:含有Tris、乙酸和EDTA,常用于DNA電泳。-TBE緩沖液:含有Tris、硼酸和EDTA,常用于DNA和RNA電泳,pH值更接近中性。-MOPS緩沖液:含有3-(N-嗎啉代)丙磺酸,常用于RNA電泳,提供更溫和的pH環境。3.主要成分:-Tris:一種弱堿,用于維持緩沖液的pH值。-乙酸或硼酸:用于調節緩沖液的pH值。-EDTA:螯合金屬離子,防止DNA酶的活性。4.使用說明:-制備凝膠:將瓊脂糖粉末與緩沖液混合,加熱至瓊脂糖完全溶解,然后倒入凝膠模具中。-電泳:將樣品與上樣緩沖液混合后,加入凝膠孔中,接通電源進行電泳。5.保存條件:-緩沖液通常可以室溫保存,但應避免長時間暴露在空氣中,防止水分蒸發或污染。江蘇大腸桿菌表達技術服務開發其優化的Loading Buffer染料不會遮擋DNA條帶的熒光亮度,確保電泳圖像清晰。
CRISPR-Cas9技術在金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)基因組編輯中的應用主要體現在以下幾個方面:1.基因敲除與功能研究:通過設計特定的sgRNA,利用CRISPR-Cas9技術可以高效地在金黃色葡萄球菌基因組中實現基因敲除,進而研究這些基因的功能。例如,研究者利用CRISPR-Cas9技術成功構建了srtA基因敲除的金黃色葡萄球菌,分析其對菌株毒力的影響。2.耐藥性研究手段開發:金黃色葡萄球菌,特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA),因其耐藥性帶來了巨大挑戰。CRISPR-Cas9技術可用于研究耐藥機制,并開發新型手段。季泉江教授課題組與韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術,有助于加快耐藥機制研究和藥物靶標發現。3.基因編輯技術的優化:CRISPR-Cas9技術在金黃色葡萄球菌中的應用還包括對編輯技術的優化。例如,研究者開發了基于CRISPR/Cas9的單質粒系統,允許在金黃色葡萄球菌中進行快速有效的染色體操作,該系統可以實現無標記、和快速的遺傳操作,加速了金黃色葡萄球菌基因功能的研究。
在設計大腸桿菌表達VLP(病毒樣顆粒)技術服務臨床前研究時,需要考慮以下幾個關鍵因素以確保研究的順利進行和結果的科學性:1.基因合成及密碼子優化:在項目初始階段,根據客戶提供的目的蛋白序列信息或質粒,進行基因合成和密碼子優化,以適應大腸桿菌的表達系統。2.載體構建:將目的蛋白基因克隆至優化的高效表達載體質粒中,并進行測序確認及大量質粒制備,為后續的表達和純化打下基礎。3.表達及純化可行性試驗:通過瞬時轉染HEK293細胞來評估VLP蛋白的表達情況,并通過QC檢測如BCA、WB、SEC-HPLC和ELISA等方法來評估蛋白的量和質。4.大量表達及純化:在確認表達可行性后,進行大規模的蛋白表達和純化,并提供純化的蛋白質量檢驗報告。5.VLP的優化:通過細胞培養基優化、細胞系工程、實驗設計和培養基組成修改等方法來提高VLP的表達量和純度。6.安全性和有效性評估:進行臨床前安全評價,包括急性毒理、重復給藥毒理、局部刺激、過敏以及生殖毒性實驗,確保VLP疫苗的安全性。7.免疫原性分析:研究VLP疫苗在動物模型中的免疫原性,包括抗體反應和細胞免疫反應,以評估其預防或疾病的能力。position:absolute;left:381px;top:191px;">如果不做新一輪基因編輯了,那就將sgRNA質粒和pHCY-25A質粒同時消除。
10×MOPSRNA緩沖液是一種常用于RNA電泳的試劑,以下是使用10×MOPSRNA緩沖液進行RNA電泳的步驟:1.準備凝膠:-將瓊脂糖粉末與10×MOPSRNA緩沖液混合,比例通常為1%至2%的瓊脂糖溶液。例如,對于1%的瓊脂糖凝膠,取1克瓊脂糖粉末加入100毫升的1×MOPS緩沖液中。-加熱混合溶液至瓊脂糖完全溶解。2.稀釋緩沖液:-將10×MOPSRNA緩沖液用DEPC處理的超純水或無菌水稀釋至1×工作濃度。例如,取100毫升的10×MOPSRNA緩沖液,加入900毫升的DEPC水,充分混勻。3.制備凝膠板:-將溶解好的瓊脂糖溶液倒入凝膠模具中,插入梳子以形成樣品孔。-待凝膠凝固后,取出梳子,準備上樣。4.樣品準備:-將RNA樣品與適當的上樣緩沖液(如甲醛上樣緩沖液)混合,通常按1:1的比例。-如果需要,可以在65-70℃下加熱樣品5-10分鐘進行變性處理。5.裝載電泳槽:-將制備好的1×MOPSRNA緩沖液倒入電泳槽的兩個槽中,確保凝膠板被緩沖液完全浸沒。6.上樣:-加載RNA樣品到凝膠孔中。通常使用微量移液器進行操作,確保樣品完全進入孔中。果。DL3000 DNA Marker憑借其準確的分子量范圍、清晰的條帶和便捷的操作,成為分子生物學實驗中不可或缺的工具。北京酵母表達高通量篩選技術服務研發
用精細化酶法提取技術,通過控制酶解條件,有效去除膠原蛋白的端肽,降低免疫原性,同時保持膠原蛋白活性 。江蘇HPV疫苗開發服務技術服務研發
畢赤酵母(Pichiapastoris)表達服務在臨床前研究中具有重要應用,主要得益于其多項優勢,包括遺傳操作方便、適合高密度發酵、能夠進行蛋白的翻譯后修飾等。以下是畢赤酵母表達服務的關鍵點,以及它們如何支持臨床前研究:1.高效表達系統:畢赤酵母表達系統能夠有效表達多種外源蛋白,如人胰島素前體,并且可以通過優化啟動子和碳源來提高產量和簡化工藝。2.翻譯后修飾:與其他表達系統相比,畢赤酵母能夠進行類似高等真核生物的信號肽剪切、二硫鍵形成、糖基化等過程的翻譯后蛋白加工,這對于許多性蛋白尤其重要。3.高密度發酵:畢赤酵母適合進行高密度發酵,這有助于提高產量并降低成本,適合生物制藥業的應用。4.重組蛋白的分泌表達:畢赤酵母可以分泌表達重組蛋白,如IL-10/Fc融合蛋白,這有助于提高蛋白的穩定性和活性。5.透皮功能研究:畢赤酵母表達的融合蛋白,如TD-1/IL-10/Fc,可以用于研究透皮給藥的方式,這對于藥物的局部具有潛在價值。6.大規模蛋白生產:畢赤酵母表達系統可以用于大規模生產重組蛋白,如顆粒溶解素,其表達量可達100mg/L。江蘇HPV疫苗開發服務技術服務研發