細(xì)胞RNA提取的方法：異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側(cè)壁沉淀，輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀，幫助分離剩余的有機(jī)試劑（剩余有機(jī)試劑過多會(huì)影響OD值和PCR反應(yīng)），輕彈沉淀，使其浮在酒精，靜置1-2min，讓酒精充分接觸沉淀，充分溶解有機(jī)試劑，然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機(jī)中瞬時(shí)離心，棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺(tái)中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥，否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水，震蕩充分溶解沉淀。測量RNA濃度。將RNA保存于-80度。植物RNA提取試劑：可從植物組織中快速提取總RNA，可同時(shí)處理大量不同樣品。廈門太原RNA提取試劑

RNA提取：預(yù)備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物，須在通風(fēng)櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上。杭州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商能迅速破碎細(xì)胞，壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶。

石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒（離心柱型）：原理簡介：改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA（RNA）從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點(diǎn)：1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好，純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn)，不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程，RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨(dú)有的MRL裂解液配方，可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程，提取RNA純度更高。

拭子RNA提取試劑的選擇？操作簡便性。操作簡便性也是拭子RNA提取試劑選擇的一個(gè)重要因素。操作過于復(fù)雜，不光費(fèi)時(shí)費(fèi)力，還容易導(dǎo)致樣本間的交叉污染，也容易損失樣本。特別是用于臨床檢測或樣本量較多情況下的檢測，操作復(fù)雜如果導(dǎo)致交叉污染會(huì)引起誤診，還會(huì)影響出檢測報(bào)告的時(shí)間。因而，選用操作簡便、流暢的提取試劑盒非常重要。就我們?cè)?jīng)用過的以上三種提取試劑盒來說，Q公司的拭子RNA提取試劑盒提取過程大約25min，從樣本處理開始需要10個(gè)步驟；T公司拭子RNA提取試劑盒整個(gè)提取過程需要1個(gè)多小時(shí)，從樣本開始處理10個(gè)步驟；B公司的Biog拭子RNA提取試劑盒提取過程大約20min，從樣本開始處理7個(gè)步驟，B公司的拭子RNA提取試劑盒在操作簡便性上具有一定優(yōu)勢，更適合于較多樣本的檢測。據(jù)了解，該產(chǎn)品已通過藥監(jiān)局備案，也更適合臨床樣本的檢測。拭子RNA提取試劑的選擇？如果離心柱硅膠膜吸附能力不好，裂解液和洗脫液沒有經(jīng)過很好的優(yōu)化。

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn)，博取眾家之長，根據(jù)多年來市場反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級(jí)和改良得來。具有操作步驟少，實(shí)驗(yàn)快捷，RNA產(chǎn)量純度高，充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要，適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量：每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度：OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染，可直接用于反轉(zhuǎn)錄，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（尤其對(duì)RNA溶液中DNA非常敏感）等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。1、快速：多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解（一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取，較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長的時(shí)間，）。2、高產(chǎn)量：多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液，保證后續(xù)RNA提取的得率。（能完全通過化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整，并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用）植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn)：是富含多酚或淀粉的植物組織中，提取高純度的總RNA。寧波RNA提取試劑銷售廠家

RNA提取試劑注意事項(xiàng)：硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細(xì)胞和組織中提取總RNA的試劑。廈門太原RNA提取試劑

經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA：這個(gè)事實(shí)可能會(huì)刷不少新手甚至老手的三觀，但確有實(shí)驗(yàn)支持：經(jīng)典Trizol法會(huì)選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點(diǎn)，源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學(xué)家，專做RNA相關(guān)的研究，包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個(gè)奇怪的“現(xiàn)象”，即貼壁細(xì)胞在消化之后，會(huì)有一些miRNA的豐度突然降低，看起來好像是被快速“降解”掉了，并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn)，這個(gè)“現(xiàn)象”難以重復(fù)：如果用Trizol做實(shí)驗(yàn)，就一定是陽性結(jié)果，而用試劑盒提RNA，就重復(fù)不出來。難道是號(hào)稱能提總RNA的Trizol方案出了問題？確實(shí)如此。經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典的Trizol方案會(huì)使得低GC比的miRNA丟失。廈門太原RNA提取試劑